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 一種耐高溫酶法合成菊粉的方法，其利用出芽胞桿菌為發(fā)酵菌種生產(chǎn)耐高溫菊粉合成酶，然后再利用耐高溫菊粉合成酶根據需要生產(chǎn)不同DP值菊粉，該方法的步驟為：⑴、培養出芽胞桿菌生產(chǎn)耐高溫菊粉合成酶：發(fā)酵原料經(jīng)高溫滅菌后打入種子罐及發(fā)酵罐中，出芽胞桿菌TKB28菌株經(jīng)過(guò)搖瓶、種子罐的二級接種后，按5%接種量接入發(fā)酵罐中，通入無(wú)菌空氣攪拌條件下，37℃恒溫發(fā)酵16小時(shí)左右，然后通過(guò)離心將菌體和發(fā)酵液分離，通過(guò)分子量20000的超濾膜濃縮菊粉合成酶溶液，測定所得菊粉合成酶濃縮液的酶活；發(fā)酵原料包括：蔗糖200g；蛋白胨50g；無(wú)機鹽2g。蔗糖為碳源，蛋白胨為有機氮源，輔以少量無(wú)機鹽類(lèi)形成發(fā)酵原料。⑵、合成菊糖反應：在底物濃度為20%的蔗糖溶液、溫度為70℃條件下，按1?1.5U/mL的加入量加入高溫菊粉合成酶，初Chemicalbook期pH值5.5，保溫8小時(shí)后當蔗糖濃度小于5%時(shí)，調節pH為7.0，同時(shí)通過(guò)流加蔗糖使蔗糖濃度維持在5?10%，12小時(shí)后停止流加；當反應進(jìn)行4小時(shí)后溶液中主要為DP值9－12的菊糖和葡萄糖及少量蔗糖，當12小時(shí)后反應結束，溶液中主要為DP值21－25的菊糖和葡萄糖；⑶、除雜與制粉：反應結束后的溶液通過(guò)微濾、離子交換樹(shù)脂除去料液中的少量不溶物、灰分、和色素，然后通過(guò)納濾膜去除葡萄糖及少量蔗糖，使菊粉的純度在95%以上，最后通過(guò)噴霧干燥制得高純度菊粉。⑷、步驟⑵合成菊糖反應進(jìn)行4小時(shí)后結束反應，將所得反應溶液進(jìn)行步驟⑶除雜與制粉，得到DP值9－12、純度在95%以上的菊粉。⑸、步驟⑵合成菊糖反應進(jìn)行12小時(shí)后結束反應，將所得反應溶液進(jìn)行步驟⑶除雜與制粉，得到DP值21－25、純度在95%以上的菊粉。